黑魚學名烏鱧(Ophiocephalus argus Cantor), 屬鱸形目,鱧科,烏鱧種,是我國常見的淡水經(jīng)濟 魚類。 黑魚營養(yǎng)價值豐富,富含人體所需的鈣、鐵 等多種微量元素,具有很好的藥用價值,可促進 傷口愈合。 黑魚魚肉中富含營養(yǎng)物質(zhì),蛋白、脂肪 含量高,使其在貯藏過程中極易腐敗變質(zhì),嚴重制 約了其經(jīng)濟發(fā)展。 尋找適合黑魚的保鮮方法成為 解決這一問題的關(guān)鍵。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗原料及藥品
鮮活黑魚, 購于錦州水 產(chǎn)市場(每條約 2 500 g);食品級花椒水提物、菊芋 水提物、魚精蛋白,均購自陜西森弗天然制品有限 公司;氧化鎂、高氯酸、氫氧化鉀(均為分析純),國 藥集團化學試劑有限公司;PCA 平板計數(shù)瓊脂,北 京奧星生物技術(shù)有限責任公司。
1.1.2 試驗儀器及設備
LRH-250A 型生化培養(yǎng) 箱, 上海一恒科技有限公司;imark 酶標儀, 美國 BIO-RAD;LDZX-50F 型立式高壓滅菌鍋,上海申 安醫(yī)療器械廠;TA-XT2i 型質(zhì)構(gòu)分析儀,英國 Stable Micro Systems 公司;CM-14 斬拌機, 西班牙 MAINCA 公司;FE20 型 pH 計, 梅特勒-托利多儀 器(上海)有限公司;FE30 型電導率儀,梅特勒-托 利多儀器 (上海) 有限公司;CR-400 型色彩色差 計, 杭州祥盛科技有限公司;Agilent 1100 型液相 色譜,美國 Agi-lent 公司;T25DS25 型均質(zhì)機,上 海申鹿均質(zhì)機有限公司;Kjeltec 8400 型全自動凱 氏定氮儀,丹麥福斯公司;Stratos 型冷凍高速離心 機,德國 Thermo Fisher Scientific 公司;NMI20 核 磁共振分析儀,上海紐邁電子科技有限公司。
1.2 試驗方法
1.2.1 保鮮劑最佳配比試驗
試驗組為 150 μL保 鮮 劑+150 μL 培養(yǎng)至二代的指示菌及 150 μL 無菌水+150 μL 培養(yǎng)至二代的指示菌; 空白組為 150 μL 保 鮮 劑+150 μL LB 液 體 培 養(yǎng) 基、150 μL 無菌水+150 μL LB 液體培養(yǎng)基。 將試驗組與空白 組加入酶標板中培養(yǎng) 24 h 后用酶標儀測定在 595 nm 波長下的 OD 值。 培養(yǎng)液的 OD 值與培養(yǎng)液中 細菌繁殖速度呈正相關(guān), 通過培養(yǎng)液 OD 值的大 小可以得知細菌的生長繁殖情況。 最終 OD595 = 試 驗組 OD595 - 對應空白組 OD595。
1.2.1.1 單因素試驗
根據(jù)前期預試驗設計單因 素試驗表,單因素試驗設計 3 組平行。
1.2.1.2 正交試驗
利用單因素試驗選出最佳的 濃度,選用 L16(43 )正交表設計正交試驗,正交試驗 設置 3 組平行。
2 結(jié)果與分析
OD 是光密度(optical density)的縮寫,表示被 檢測物吸收掉的光密度, 可反映酶活力及菌活性。 OD 值越小表示菌吸收的光越少,菌密度越 小,即保鮮劑的抑菌性越強。 表 3 表示單因素試驗 所獲得的 OD595 結(jié)果。從表中可以看出每種保鮮劑 在試驗所設的 5 個濃度中, 最終 OD 值均小于無 菌水組的最終 OD 值。 這表明試驗所選擇的保鮮 劑及所設置的試驗濃度能夠有效抑制指示菌的生 長,從而證明其具有一定的保鮮效果,試驗獲得的 最佳抑制濃度依次為魚精蛋白 0.5%、花椒提取物 0.5%、菊芋提取物 1%。微生物生長過程中自身代謝產(chǎn)物及所分泌的 蛋白酶、脂肪酶會分解魚肉中的蛋白質(zhì)、脂肪,使 其腐敗變質(zhì), 因此菌落總數(shù)可以作為指示魚肉腐敗變質(zhì)程度的指標。 《國際微生物規(guī)格委員會 (ICMSF)食品微生物限量規(guī)定》白皮中指出 5.69 lgCFU/g 為魚菌落計數(shù)可接受值,7 lgCFU/g 即為安 全限量值。 0 d 的菌落總數(shù) 為 3.18 lgCFU/g,說明樣品在運輸及處理過程中 未 受 到 污 染,且 3.18 lgCFU/g 的 值符合勵建榮等研究所得的鮮魚菌落總數(shù)值。 從圖中可以看出 9 d 前菌落總數(shù)的增長相對較快, 說明第 9 天為微生 物生長的拐點,這是由于貯藏初期,魚肉中的蛋白 質(zhì)、脂肪等營養(yǎng)成分含量較為豐富,能夠為微生物 生長提供充足的營養(yǎng)。 但隨著貯藏時間的延長,魚 肉中的營養(yǎng)物質(zhì)被逐漸分解消耗, 使微生物對其 的利用率有所降低, 從而限制了微生物的生長速 率;此外,貯藏后期隨著微生物的不斷繁殖,其相 互之間的競爭作用不斷增強, 從而使其生長速率 減慢。 在貯藏過程中,處理組的菌落總數(shù)始終低于 空白組,且經(jīng)復合保鮮劑處理的樣品值最低,其中 空白組在第 7 天時已達到規(guī)定的安全限量值。 而 處理組在第 9 天開始陸續(xù)達到安全限量值, 其中 復合處理組在 13 d 時才達到安全限量值。 這說明 復合保鮮劑能夠有效抑制黑魚片在貯藏過程中菌 落總數(shù)的增長,從而延緩其腐敗速率。
3 結(jié)論
通過對黑魚魚片樣品菌落總數(shù)、pH、 電導率、 TVB-N、K 值、質(zhì)構(gòu)、白度、持水性及水分分布等指 標進行分析,比較各組保鮮劑對(4 ± 1)℃冷藏條 件下黑魚魚片的保鮮效果。 試驗結(jié)果表明,處理組 的菌落總數(shù)、TVB-N、pH 值、質(zhì)構(gòu)、K 值、電導率及 持水性均優(yōu)于空白組,且復合處理組(花椒提取物 0.3%,魚精蛋白 0.3%及菊芋提取物 0.6%)的效果 最為明顯。 經(jīng)魚精蛋白、花椒提取物和復合保鮮劑 處理的魚片白度低于空白組, 但是顏色變化不顯 著(P>0.05)。 以上結(jié)果表明復合保鮮處理可有效 抑制魚肉貯藏過程中微生物的生長繁殖, 減 緩ATP 和蛋白質(zhì)的降解,從而顯著延長其保鮮期,并 通過協(xié)同作用達到更好的保鮮效果。 因此,該復合 生物保鮮劑在黑魚魚片保鮮中擁有廣闊市場前 景。