口腔鱗狀細(xì)胞癌，簡稱口腔癌，是口腔頜面部 最常見的惡性腫瘤之一，預(yù)后較差，五年生存率僅為 40%～50%。多年來，對于口腔癌采用的治療方法是手術(shù) 聯(lián)合放、化療的綜合治療，現(xiàn)臨床上常用的化療藥物：5-氟 尿嘧啶、順鉑、紫杉醇及長春新堿等多有毒副作用大，易 產(chǎn)生耐藥性等不良反應(yīng)，因此，亟待尋找到一種應(yīng)用劑量 少，不良反應(yīng)小且靶向性強的化療藥物。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)

SCC-9細(xì)胞系購于南京科佰生物科技有限公司。使用 10%胎牛血清、DMEM/F12培養(yǎng)液、1%青鏈霉素混合液配 制成的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)SCC-9細(xì)胞系，將細(xì)胞系置于37℃、 5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱(上海一恒LHS-100CH恒溫恒濕培養(yǎng)箱)中培養(yǎng)。 

1.2 細(xì)胞增殖實驗

將處于對數(shù)生長期的SCC-9細(xì)胞，按照1.0×104個細(xì)胞 ／孔的密度接種于96孔板，每孔100 μL，每組設(shè)3個復(fù)孔。 24 h后去除培養(yǎng)基，以不加藥的完全培養(yǎng)基組作為對照組， 分別以完全培養(yǎng)基和苦參堿配制0.125、0.25、0.5和1.0 g/L 的苦參堿溶液作為藥物組作用于SCC-9細(xì)胞，每孔100 μL。 12、24 h后向每孔中加入10μL CCK-8試劑，于37℃細(xì)胞培養(yǎng) 箱中孵育4 h，在酶標(biāo)儀450nm處測量各孔OD值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用GraPhPad Priam7.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實驗數(shù) 值采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，組間差異比較采 用方差分析和t檢驗，以P＜0.05為差 異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2  結(jié)  果

苦參堿抑制口腔癌細(xì)胞SCC-9的增殖：CCK-8法檢測不 同濃度的苦參堿作用于SCC-9細(xì)胞后，在不同時間的細(xì)胞 增殖抑制作用。圖1所示，苦參堿可以抑制SCC-9細(xì)胞的增 殖，且呈濃度和時間依賴作用。除12 h的0.125 g/L的苦參堿 作用于細(xì)胞后與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義，其余各濃度組 在12、24 h后與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 我們將OD值換算成細(xì)胞抑制率，圖2所示，各實驗組的 細(xì)胞抑制率隨著苦參堿濃度的升高而增加，呈劑量依賴關(guān)系。

3  討  論

苦參堿是從苦參干燥根莖中提取的活性成分，除具有 抗炎、抗病毒、抗纖維化和調(diào)節(jié)免疫力等作用外，近年 研究證實苦參堿對多種腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用，它能 有效抑制腫瘤細(xì)胞增殖以及促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。 本研究采用CCK-8法觀察苦參堿對口腔癌SCC-9細(xì)胞 的體外增殖的影響。結(jié)果顯示苦參堿對口腔癌SCC-9細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用，并具有時間－濃度依賴性。Yu， H.B向肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)中加入苦參堿，采用MTT法發(fā)現(xiàn)， 肝癌細(xì)胞的增殖受到抑制。苦參堿對胰腺癌、膀胱癌細(xì)胞 增殖也有抑制作用。且隨著藥物濃度增加，細(xì)胞增殖抑制 率逐漸增高，呈劑量依賴性。雖然我們已經(jīng)證實苦參堿能 夠抑制口腔癌細(xì)胞的增殖，但是其中的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。