法國梧桐學(xué)名懸鈴木（Platanus orientalis L.）， 又稱法桐，原產(chǎn)于東南歐、印度及美洲。法國梧桐喜 溫暖、濕潤環(huán)境，為闊葉落葉喬木，樹干粗大，壽命 長；葉大蔭濃，樹姿優(yōu)美，具有超強(qiáng)的吸收有毒有害 氣體、抵抗煙塵、隔離噪音能力，且病蟲害少。由于 法國梧桐具有良好的觀賞和綠化性能，全國許多城 市都將其作為主要綠化樹，特別是北方城市，常常 將其作為主要綠化樹種，栽培界限一直向北移動。 北京市內(nèi)一些街道將法國梧桐作為行道樹。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

供試材料為北京市海淀區(qū)曙光花園小區(qū)周邊 行道樹法國梧桐，所采枝條均為生長狀況基本一致 的 1 年生枝條。

1.2 試驗器材

電子天平（JA2603B，上海精科實業(yè)有限公司）； 干燥箱（PH030A 型，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）； 磁力攪拌器（HJ-3，金壇市中正儀器制造有限公 司）；pH 計 （HI2221，意大利 HANNA）；水浴鍋 （HWS-24，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；電導(dǎo)儀 （HANNA EC215，意大利 HANNA）。

1.3 試驗方法

1.3.1 材料采集

2015 年 12 月中旬，從發(fā)育正常 的 1 年生枝條第 4 個芽開始，剪取 40～50 cm 長的 枝條，置于聚乙烯袋中，帶回實驗室。枝條用自來水、 蒸餾水和重蒸餾水沖洗干凈后，用紗布擦干，備用。

1.3.2 氯化鈉溶液處理

為了模擬冬季融雪劑對 法國梧桐的影響，利用 0.5%的氯化鈉溶液浸泡處 理法國梧桐枝條 24 h，同時以不處理作為對照。

1.3.3 低溫處理

未處理和氯化鈉處理的法國梧 桐置于自封袋中，分別置于 0，-5，-10，-15，-20，-25， -30，-35 ℃的低溫冰箱中處理 24 h，再以 5 ℃/h 的 速度升溫至 0 ℃，然后取出枝條，在室溫下解凍 1 h， 用濾紙吸干水分，將冷凍后的枝條剪成 0.5 cm 小段 （不含芽部分）。

1.3.4 電導(dǎo)率的測定

分別稱取處理和對照樣本 3 g 放于試管中，加入 30 mL 無離子水，真空滲入 10 min，靜置 12 h 左右。用電導(dǎo)儀測定浸提液的電 解質(zhì)滲出率；然后將樣品密封置于沸水浴中煮 1 h， 靜置 12 h 左右，測定浸提液的電解質(zhì)滲出率，其為細(xì)胞全部被破壞后浸提液的電解質(zhì)滲出率，代表離 體枝條細(xì)胞電解質(zhì)總量。以自然條件下（0 ℃）的電 解質(zhì)滲出率為對照 。每處理重復(fù) 3 次 。 相對電導(dǎo)率＝S1/S2×100％ （1） 式中，S1 為初始電導(dǎo)率；S2 為煮沸后電導(dǎo)率。

1.3.5 Logistic 回歸分析

Logistic 回歸分析參照王 曉輝等的方法進(jìn)行。對試驗數(shù)據(jù)（相對電導(dǎo)率）進(jìn) 行 Logistic 回歸分析，回歸模型如下。 y＝K（1 / ＋ae-bx） （2） K＝（y2 （2 y1＋y3 ）-2y1y2y3 ）（/ y2 2 －y1y3 ） （3） 式中，y 為相對電導(dǎo)率，y1、y2、y3 為測定結(jié)果中 等距離的三點的相對電導(dǎo)率，拐點為 d2 y/dx2 ＝0 時 的 x 值，經(jīng)求導(dǎo)簡化可得如下公式。 x＝lna/b （4） Logistic 方程如下。 y＝K（1 / ＋ae-bt） （5） 式中，y 為實測細(xì)胞傷害率；t 代表冷凍溫度；K 為細(xì)胞傷害率的飽和容量。因本試驗中細(xì)胞傷害率 消除了本底干擾，故 K 值為 100；a、b 為方程參數(shù)。 為確定 a、b 值，將 Logistic 方程轉(zhuǎn)化為式（6）。 ln（K－y）/y＝lna－bt （6） 令 y′＝ln（K－y）/y，則轉(zhuǎn)化成細(xì)胞傷害率（y′） 與處理溫度（t）的直線方程。通過直線回歸求出 a、b 值及相關(guān)系數(shù)，對回歸方程進(jìn)行二階導(dǎo)數(shù)變換得到 方程曲線的拐點值，即為低溫半致死溫度（LT50）。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用 Excel 2003 和 SAS 8.1 軟件進(jìn)行統(tǒng)計 分析。

2 結(jié)果與分析

0.5%的氯化鈉處理和未處理（對照）法國梧桐 枝條經(jīng)不同低溫處理后，相對電導(dǎo)率呈現(xiàn)較為一致 的變化趨勢（圖 1），均隨著低溫處理溫度的下降，法 國梧桐枝條內(nèi)相對電導(dǎo)率上升，0～-15 ℃相對電 導(dǎo)率上升平緩；然后在 -15～-25 ℃低溫相對電導(dǎo) 率急劇升高；之后又趨于平緩。但是，0.5%的氯化鈉 處理和未處理之間存在一定差異。由此說明，0.5% 的氯化鈉溶液處理對法國梧桐的耐寒性有一定影 響。植物的細(xì)胞在致死性傷害出現(xiàn)之前，往往有一 個從可逆到不可逆?zhèn)Φ闹饾u發(fā)展過程，在這一過 程中，有的細(xì)胞有“修復(fù)”能力，因而整個組織在不 同溫度下電導(dǎo)率總是呈“S”形曲線，故用 Logistic 方 程進(jìn)行擬合，與真實情況較為接近 。CK 枝條的的 Logistic 方程為 y＝100/ （1＋ 3.23e0.073）（t R2 ＝0.832**），表現(xiàn)出細(xì)胞傷害率（y）與處 理溫度（t）之間存在顯著的直線相關(guān)關(guān)系，低溫半 致死溫度為 -16.07 ℃。

3 結(jié)論與討論

低溫對植物可造成生物膜系統(tǒng)損傷，目前細(xì)胞 膜透性已作為檢測植物耐寒性大小的一個重要指標(biāo)。電解質(zhì)外滲率大小可反映出植物受害程度， 低溫脅迫下，抗寒性較差的植物膜透性增加速度較 快。目前，利用電導(dǎo)法測定細(xì)胞膜透性已成為常規(guī) 耐寒性的測定方法，為國內(nèi)外研究者廣泛應(yīng)用，并 獲得了較為理想的結(jié)果。本研究利用電導(dǎo)法結(jié)合 Logistic 方程通過求拐點可計算出低溫半致死溫 度，其表現(xiàn)出的差異可以用于衡量耐受低溫的能 力，且這種差異表現(xiàn)為拐點溫度與抗寒力之間呈負(fù) 相關(guān)趨勢，拐點溫度越低，表明其半致死溫度越 低，即該樹種抗寒性越強(qiáng)。結(jié)果的準(zhǔn)確程度要進(jìn)行 Logistic 方程擬合度顯著性檢測，擬合度達(dá)顯著水 平時，計算出的結(jié)果才精確可靠。本試驗中，擬合度 結(jié)果均達(dá)到顯著水平，故求出的 LT50 可信度較高。