1 材料

實(shí)時(shí) 熒 光 定 量 PCＲ 系 統(tǒng) ( 型 號(hào) 為 7500 ＲeaL Time PCＲ System)，購(gòu)自美國(guó) AppLied Biosystems 公 司;紫外分光光度儀(型號(hào)為 UV－20)，購(gòu)自 Hoefer 公 司;電泳儀(型號(hào)為 DYY－6C)，購(gòu)自北京六一生物科 技有限公司;電熱恒溫水槽(型號(hào)為 DK－8D)，購(gòu)自上海一恒科技有限公司。

2 方法

120 只 1 日齡伊莎公雞飼喂 15 d 后隨機(jī)分為 12 組，其中急性冷應(yīng)激處理 6 個(gè)組，慢性冷應(yīng)激處理 6 組，10 只/組。在急性冷應(yīng)激處理中，其中 5 個(gè)組伊 莎公雞處于(12 ±1)℃ 的寒冷環(huán)境中并分別保持 1， 3，6，12，24 h，作為試驗(yàn)組;另一組伊莎公雞保持在 25 ℃環(huán)境中，作為對(duì)照組(0 h 組)。在慢性冷應(yīng)激 處理中，其中 3 個(gè)組伊莎公雞處于(12±1)℃ 的寒冷 環(huán)境中并分別保持 5，10，20 d，作為試驗(yàn)組;并分別設(shè) 立 3 個(gè)對(duì)照組，25 ℃保持 5，10，20 d。試驗(yàn)期間伊莎 公雞可以自由獲取食物和水。在各時(shí)間點(diǎn)剖殺伊莎 公雞后立即取 0. 5 g 肝臟組織保存于液氮中，用于后 續(xù)實(shí)時(shí)熒光定量 PCＲ 擴(kuò)增、Western－blot 檢測(cè)。

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