馬齒莧( Portulaca oleracea L) 為馬齒莧科植物 馬齒莧的全草，是一年生的肉質(zhì)草本植物，在我國有 著悠久的應(yīng)用歷史，其營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值都很高， 是我國衛(wèi)生部規(guī)定的 78 種藥食同源野生植物之一。 馬齒莧性寒，酸，入心、肝、脾、大腸經(jīng)，具有清熱解 毒、涼血止血、止痢健胃等功效。

1 儀器與試劑 

UV2550 型紫外-可見分光光度計(jì)( 日本島津) ;FA1204B 型電子分析天平( 上海佑科儀器儀表有限 公司) ; ＲE-52A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( 上海亞榮生化儀器 廠) ; SHB-B95A 型循環(huán)水式多用真空泵( 鄭州長城 科工貿(mào)有限公司) ; DZF-6020 型真空干燥箱( 上海一恒科學(xué)儀器有限公司) ; FW135 型中草藥粉碎機(jī)( 天 津市泰斯特儀器有限公司)

2 方法與結(jié)果

精密稱量蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 10 mg，得濃度為 0. 2 mg·ml-1 的對(duì)照品儲(chǔ)備液，備用。稱取干燥后的馬齒 莧樣品粗粉 10. 00 g，石油醚回流脫脂后按單因素實(shí) 驗(yàn)和效應(yīng)曲面設(shè)計(jì)法試驗(yàn)中不同的提取條件回流提 取，將提取液冷卻濃縮，用 60% 乙醇溶解定容至 50 ml 容量瓶中，作為樣品待測液。精密量取對(duì)照品溶液 0. 5 ml、1. 0 ml、2. 0 ml、3. 0 ml、4. 0 ml、5. 0 ml，分別 用 60% 乙醇溶液定容至 10 ml 的容量瓶中，各加入 1 ml 5% NaNO2 溶 液，振 搖，放 置 6 min，加 入 1 ml10% AL( NO3 ) 3 溶液，振搖，再放置 6 min，然后各 加入 4% NaOH 溶液 1 ml，用 60% 乙醇定容，振搖， 靜置 15 min，在波長 510 nm 處測定。以蘆丁濃度為 橫坐標(biāo)( X) ，吸光度為縱坐標(biāo)( Y) ，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得 方程 Y = 16. 105X － 0. 0046( Ｒ2 = 0. 9998) 。取馬齒莧粗粉 5 份，每份 10. 0 g，分別加入 10 倍量 體積乙醇濃度 50% 、60% 、70% 、80% 和 90% 的溶液 回流提取 1 h，按“2. 2. 1”項(xiàng)下操作，于 510 nm 處測 定，計(jì)算出總黃酮的含量，結(jié)果見圖 1。隨著乙醇體 積濃度的增加馬齒莧總黃酮的提取率隨之升高，當(dāng) 乙醇濃度為 80% 時(shí)，總黃酮的提取率最高，隨后總 黃酮提取率開始下降。因此，提取時(shí)選擇濃度為 70% ～ 90% 乙醇。

3 討 論 

通過單因素分別考察了料液比、提取溫 度、提取時(shí)間和乙醇濃度對(duì)馬齒莧總黃酮提取率的 影響，確定了影響提取率的主要因素。由于 Box-Behnken 效應(yīng)面法是采用非線性數(shù)學(xué)模型擬合，并在 中心點(diǎn)進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，可以提高試驗(yàn)的精確度，能 夠更好的體現(xiàn)各因素與效應(yīng)值的關(guān)系，故本實(shí)驗(yàn) 采用 Box-Behnken 效應(yīng)面法設(shè)計(jì)試驗(yàn)，建立了回歸 模型，并通過方差分析，得出各個(gè)因素之間的交互作 用都很強(qiáng)，確定影響馬齒莧總黃酮提取率的因素主 次關(guān)系依次為提取溫度 ＞ 乙醇濃度 ＞ 料液比。此模 型能較好地預(yù)測馬齒莧提取的總黃酮得率，對(duì)將 Box-Behnken 效應(yīng)面法用于馬齒莧中總黃酮提取工 藝的產(chǎn)業(yè)化具有一定的指導(dǎo)意義。

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